PCR基因擴增儀是自動化和智能化的儀器設備
更新時間:2015-11-20
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PCR基因擴增儀的設計均按照DNA變性、復性和延伸三個環(huán)節(jié)以及溫度均恒、傳導快和升降溫迅速等原則,結合傳感技術、微電子技術和電子計算機等技術發(fā)展而成的自動化和智能化的儀器設備
PCR基因擴增儀是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成,它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前常用的技術,可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據(jù)DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實時熒光定量PCR儀四類。
PCR基因擴增儀技術原理
該技術是在模板DNA、引物和四種脫氧核糖核苷酸存在下,依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應。DNA聚合酶以單鏈DNA為模板,借助一小段雙鏈DNA來啟動合成,通過一個或兩個人工合成的寡核苷酸引物與單鏈DNA模板中的一段互補序列結合,形成部分雙鏈。在適宜的溫度和環(huán)境下,DNA聚合酶將脫氧單核苷酸加到引物3´-OH末端,并以此為起始點,沿模板5´→3´方向延伸,合成一條新的DNA互補鏈。
PCR基因擴增儀反應步驟
分別是1.變性,2.引物退火,3.引物延伸。所謂變性是將DNA加熱至90-95℃變性,將雙鏈DNA加熱后轉為單鏈DNA做為復制的模板.而引物退火則是引物于一定的溫度下(冷卻至55-60℃)附著于模板DNA兩端。zui后在DNA聚合酶的作用下(加熱至70-75℃)進行引物的延伸及另一鏈的合成。